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  • 什么是质粒转化?质粒转化的基本原理是什么?

    2023-02-23 14:51:18 来源: 新商报网

什么是质粒转化

质粒转化是指将外源质粒导入原核细胞的过程。其中的转化是指将外源的脱氧核糖核酸分子引入受体细胞,使之获得新的遗传性状的一种手段。

将质粒脱氧核糖核酸导入细菌的过程称为转化。此感受态细菌细胞在氯化钙低渗溶液中膨胀为球状。质粒脱氧核糖核酸与氯化钙形成抗磷酸钙复合物黏附于细菌表面,经42摄氏度短时间的热冲击处理,促进细胞吸收脱氧核糖核酸复合物。在丰富培养基上生长数小时后,球状细胞复原并分裂增殖。被转化的细菌中,外源基因得到表达。在选择性培养平板上,可选出所需的转化子。

质粒转化的基本原理是什么?

1.基本原理

将质粒 DNA 导入细菌的过程称为转化( Transformation )。此感受态细菌细胞在 CaCl 2 低渗溶液中胀大为球状(感受态细菌的制备,见前)。质粒 DNA 与 CaCl 2 构成抗 DNase 羟基 - 磷酸钙复合物黏附于细菌表面,经 42℃ 短时刻热冲击处理,促进细胞吸收 DNA 复合物。在丰富培育基上生长数小时后,球状细胞恢复并分裂增殖。被转化的细菌中,外源基因得到表达。在选择性培育平板上,可选出所需的转化子(即含有质粒 DNA 的细菌)。钙处理的感受态细胞,一般每微克 DNA 能取得 10 5 ~ 10 6 个转化子。除化学办法转化细菌外,还有电穿孔法( Electroporation ),其转化率可高达 10 9 ~ 10 10 个转化子 /μg 质粒 DNA 。

关键词: 质粒转化 质粒转化的基本原理 外源基因 电穿孔法

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